Ātra nevēlamo mikrobu noteikšana pārtikas ražošanā, izmantojot biočipu
Kopsavilkums par noformējumu 44. KULMBACHER nedēļa 2009
Pārtikas nekaitīgums un procesu higiēna ir galvenās pārtikas rūpniecības problēmas. Šeit svarīgs aspekts ir izvairīšanās no piesārņojuma ar higiēniski atbilstošām mikrobiem, piem. B. Escherichia coli pārtikas ražošanā. Līdz ar jaunā kopienas higiēnas likuma ieviešanu 01. gada 2006. janvārī tas ieguva papildu nozīmi.Pašlaik praksē izmantotās klasiskās mikrobioloģiskās metodes ir laikietilpīgas un dārgas un rada problēmas, jo īpaši maziem un vidējiem uzņēmumiem (MVU) pārtikas rūpniecībā, jo ir jāpieņem ārpakalpojumu piedāvājumi, jo trūkst iekšēju pakalpojumu. laboratorijas jaudas. Turklāt klasiskās mikrobioloģiskās kontroles ilgstošais ilgums izraisa procesa ķēdes aizkavēšanos, kas savukārt noved pie aizkavētas produkta izdalīšanās. Alternatīvās imunoloģiskās un molekulāri bioloģiskās noteikšanas metodes ir pakļautas neveiksmēm, jo īpaši sarežģītās matricās, un tām ir salīdzinoši augsta noteikšanas robeža, vai tām ir nepieciešamas dārgas iekārtas, kuras var darbināt tikai speciālists.
Imunoloģisko un molekulāri bioloģisko noteikšanas metožu miniaturizācija ļauj integrēt baktēriju noteikšanu tā sauktajās laboratorijas mikroshēmas sistēmās. Ar šādu sistēmu palīdzību var sasniegt tādu automatizācijas līmeni, kas ļauj darboties nepieredzējušam personālam.
Šādas sistēmas piemērotība baktēriju noteikšanai pārtikas ražošanas laikā tika pētīta sadarbības projektā Escherichia coli ātrai noteikšanai visos pārtikas ražošanas posmos, izmantojot tiešu un specifisku baktēriju 16S rRNS noteikšanu.
Kopīgā projekta ar Baireitas Universitāti (bioķīmijas laboratoriju) galvenā ideja ir tieša 16S ribosomu ribonukleīnskābju (rRNS) noteikšana. Tie ir sastopami lielā skaitā katrā baktēriju šūnā kā ribosomu celtniecības bloki, kas ir šūnu proteīnu ražošanas vietas. Tas ir paredzēts, lai izvairītos no amplifikācijas posmiem, piemēram, polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR). 16S rRNS tiek noteikts elektroķīmiski biočipā, izmantojot jaunu reportiera enzīmu esterāzi 2 no Alicyclobacillus acidocaldarius.
AiF-FEI finansētajā pētniecības projektā (ZuTech pētniecības projekts AiF 230 ZN) tika optimizēti biočipa un parauga sagatavošanas bioķīmiskie parametri, kas sastāv no RNS izolācijas un bagātināšanas posma.
Šādā veidā izveidotā E. coli kopējā noteikšana beidzot tika izmantota sērijveida eksperimentā 25 gaļas paraugu kvalitātes kontrolei. Rezultāti apstiprināja uzticamu 2000 KVV/ml bagātinājuma noteikšanu, kā arī augsto selektivitāti un jutīgumu izstrādātajai E. coli noteikšanas procedūrai ≤ 1 KVV/ml pilienu sulas pēc 5 stundu bagātināšanas. Izstrādātā noteikšanas sistēma sniedz analīzes rezultātus aptuveni 7 stundu laikā, t.i., vienas darba dienas laikā, un tāpēc principā ir ļoti labi piemērota izmantošanai pārtikas ražošanā.
No KULMBACHER nedēļas prezentācijas ir pilnībā dokumentēti biļetenā Förderergesellschaft gaļas pētniecībai Kulmbach.
Laikraksts ar konveijeru biedrības gaļas pētniecībai Kulmbach un nosūtīja bezmaksas locekļiem. Ieguves uzņēmums izmanto ievērojamus resursus, kas tiek izmantoti, lai pētījumu par MRI, Kulmbach.
vairāk www.fgbaff.de
Avots: Kulmbahs [ HEIDENREICH, B., Ch. PÖHLMANN, Ch. SPRINZL un M., GAREIS ]
